溶酶體pH值檢測試劑盒（綠色熒光）

產(chǎn)品概述product description

溶酶體pH (Intracellular pH, pHi) 是酶活性和細胞功能的重要生理決定因素,所有蛋白質(zhì)都依賴于嚴格調(diào)節(jié)的pH值以維持其結(jié)構(gòu)和功能。質(zhì)子-去質(zhì)子化可以指示生物表面的電荷，并且是許多代謝反應(yīng)中的組成部分。細胞已經(jīng)開發(fā)出多種機制來保持pHi的窄范圍，以響應(yīng)pH值的細胞內(nèi)和細胞外波動。

溶酶體pH值檢測試劑盒采用溶酶體pH值熒光探針檢測溶酶體pH值的cllProbeTM P02是pH敏感的熒光染料,在采用黃綠色發(fā)射光檢測時，其熒光強度隨著pH值降低而增強，反之堿性條件下變低，從而可被用于監(jiān)測溶酶體pH變化,見圖一。市面上現(xiàn)有的pH探針不適用于研究酸性細胞器如溶酶體，內(nèi)涵體，精子和頂體，因為它們的熒光在較低pH下顯著降低。另外, 市面上現(xiàn)有的pH探針不能選擇性地定位于酸性細胞器中。是研發(fā)的適合溶酶體pH檢測的熒光探針，它是一種可以穿透細胞膜的熒光染料, 是一種嗜酸性的熒光染料，它在較低的pH下發(fā)出強烈的黃綠色熒光。PO2進入細胞后, 產(chǎn)生特異性的溶酶體聚集。產(chǎn)生的熒

光物質(zhì)最大激發(fā)波長為385nm,最大發(fā)射波長為540nm,其在不同的pH值條件下發(fā)射的熒光強度不同，從而可以反映溶酶體pH值的變化情況。主要用于哺乳動物細胞的研究。在有溶酶體pH變化的細胞毒性、細胞凋亡、細胞粘附、藥物抵抗、 細胞趨化等過程中也可應(yīng)用。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為380-405nm左右,發(fā)射波長為525 ~ 550nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細胞

儀檢測溶酶體pH值的變化。

保存溫度

2-8°C避光

注意事項

1.探針長期不用可以20°C保存。避免反復凍融。

2.探針A為DMSO溶液,冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離

心至管底部再開蓋。

有效期

6個月

檢測方法

流式細胞儀/熒光酶標儀/光度計/激光共聚焦/熒光顯微鏡

適用樣本

產(chǎn)品應(yīng)用

流式細胞儀/熒光酶標儀/光度計/激光共聚焦/熒光顯微鏡

儀器準備

1.流式細胞儀或熒光酶標儀或光度計或激光共聚焦或熒光顯微鏡

2.離心機

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

a

試劑準備

1.PBS緩沖液2.HBSS 3. (備選) Nigericin sodium salt (相關(guān)產(chǎn)品BB-94002)

耗材準備

1.離心管

2.吸頭

3.-次性手套

使用注意事項

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。使用前,先將

本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。

2.pH探針為DMSO;溶液,冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。 注意需要加熱溶解,吸頭也

需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。