外泌體（Exosomes）提取試劑盒-血清/血漿2ml/T

產(chǎn)品概述product description

總外泌體(Exosomes)提取試劑盒(血清/血漿用)適用于從各種血清/血漿樣品中提取總外泌體。不需要超速離心,僅需通過簡單的常規(guī)離心即可從樣本中獲取大量結(jié)構(gòu)完整的外泌體,具有快速簡單,提取效率高的特點(diǎn)，可節(jié)省更多的實(shí)驗(yàn)時(shí)間和樣本。提取的外泌體可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠?/p>

于后續(xù)的多種實(shí)驗(yàn),應(yīng)用范圍廣泛。外泌體是活細(xì)胞分泌的來源于晚期核內(nèi)體(也稱為多囊泡體)的膜性小囊泡，直徑約為30-150nm，天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各種體液中，研究發(fā)現(xiàn), Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)、mRNA和microRNA, 并組exosome能夠通過生物屏障,在細(xì)胞間傳遞功

能性核酸分子,從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能。外泌體囊泡已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)， 參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號傳遞，以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過程。 外泌體囊泡的病理生理作用開始在包括癌癥、感染性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到充分認(rèn)識，顯現(xiàn)了外泌體作為疾病的早期診斷、治療干預(yù)的潛在新靶點(diǎn)的巨大應(yīng)用前景。此外,未修飾和工程化的外泌體囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用價(jià)值。傳統(tǒng)的血清/ 血漿中分離和提取exosome的主要方法是超速離心法，這種方法缺點(diǎn)是耗時(shí)耗力，往往需要30-70個小時(shí)，每次最多只能處理6個樣品，需要大量的起始材料，而且產(chǎn)量不高。

生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒系列產(chǎn)品,可以通過簡單離心快速高效獲得高純度外泌體顆粒。本試劑盒提取的外泌體完好無缺，能用于各種功能研究、蛋白分析及RNA分析等下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。本試劑盒按每個樣本處理2ml血清/血漿計(jì)，每個50T試劑盒大約可以用于提取100ml血清/血漿。如果需要處理大量的血清/血漿,將提取液按說明書標(biāo)準(zhǔn)操作的體積等比例調(diào)整即可。

保存溫度

2-8°C

注意事項(xiàng)

1.低溫有沉淀析出的話可以在37°C短時(shí)間水浴溶解，搖勻后使用。

2.試劑拆封后請盡快使用完!

有效期

年

檢測方法

外泌體研究

適用樣本

血清/血漿

產(chǎn)品特點(diǎn)

1.使用方便，無需超速離心，省時(shí)省力;

2.純度高，富集量大,應(yīng)用范圍廣;

3.獲取白

的Exosome結(jié)構(gòu)和功能完整;

4.穩(wěn)定性好，便于運(yùn)輸，便于保存。

產(chǎn)品應(yīng)用

外泌體研究

儀器準(zhǔn)備

1.離心機(jī)

2.移液器

3.冰箱

4.冰盒

耗材準(zhǔn)備

1.離心管

2.吸頭

3.-次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.不同細(xì)胞分泌的外泌體數(shù)量差異極大,請根據(jù)實(shí)際情況選擇培養(yǎng)基樣品的量,根據(jù)下游應(yīng)用和參考文獻(xiàn)確定。條件允許

的情況下采用盡可能多的細(xì)胞培養(yǎng)上清。

2.-般巨噬細(xì)胞、 淋巴細(xì)胞、造血細(xì)胞、胰腺癌細(xì)胞等分泌外泌體較多,其它細(xì)胞樣本建議每個樣培養(yǎng)基上清用量不少于

8 ml。常規(guī)的細(xì)胞樣本最佳培養(yǎng)上清上樣量為15-20 m及以上，條件允許的情況下采用盡可能多的細(xì)胞培養(yǎng)上清。

3.條件允許的情況下可以將細(xì)胞培養(yǎng)上清濃縮后再提取外泌體。

使用方法

1.收集2m待提取的血清/血漿樣品，置2-8C保存。

2.將樣品在4°C條件下，3000xg離心15分鐘。 棄沉淀，收集上清。

3.小心將上清移入另一干凈離心管中。

4.將樣品在4°C條件下, 10000xg離心20分鐘。棄沉淀，收集上清。

5.小心將上清移入另-干凈離心管中。

6.在2ml血清/血漿樣品中加入2ml提取液A,蓋緊離心管蓋，上 下顛倒混勻1分鐘左右,使液體充分混勻。

7.在4ml液體樣品中加入1ml提取液B,蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右,使液體充分混勻。

8.置2-8*C冰箱靜置過夜。

9.在4°C條件下, 1000xg離心60分鐘。

10.小心移除上清,收集沉淀。

11.取50-100外泌體保存液將沉淀重懸，即得到外泌體樣品。

12.將外泌體樣本-80°C保存或直接用于下游應(yīng)用。

常見問題分析

1.如何鑒定提取的外泌體?

通常使用透射電鏡檢測(形態(tài))、粒徑檢測 (大小、外泌體標(biāo)志蛋白Western blot檢測等方法鑒定提取的外泌體。