細胞耗氧率檢測試劑盒

產(chǎn)品概況proauct description

細胞氧氣消耗檢測試劑盒(Oxygen Consumption Assay Kit / OxygenConsumption Rate Assay Kit / OCR Assay Kit)是利用合成的特異性氧氣熒光探針

來檢測細胞外耗氧情況變化的試劑盒?？梢酝ㄟ^簡單的混合基于熒光酶標(biāo)儀便捷的直接進行耗氧量測定。耗氧量分析是研究代謝的有用工具。 耗氧量測量結(jié)果是細胞代謝功能，更具體而言是線粒體功能的關(guān)鍵性指示。通過這類指標(biāo)來探究活細胞代謝,可為細胞功能以及代謝變化在疾病進展中的作用提供深入洞察。線粒體功能對細胞代謝、存活和能量產(chǎn)生至關(guān)重要。線粒體呼吸受損與病理狀態(tài)(如癌癥、缺血性再灌注損傷和神經(jīng)退行性疾病)有關(guān)。線粒體毒性也是安全相關(guān)的抗藥性和藥物戒斷癥狀的常見原因。耗氧量分析可以實時測量全細胞或分離線粒體的耗氧量，是以高通量形式來評估用于代謝表征的細胞呼吸以及評估治療對線粒體功能毒性作用的-種可靠方法。它可以使用熒光酶標(biāo)儀在標(biāo)準(zhǔn)微孔板上進行有氧代謝的簡單動力學(xué)測定。隨著呼吸作用的進行,溶解氧被消耗,樣品中的氧氣濃度降低，導(dǎo)致分析的信號增加，從而實現(xiàn)對耗氧量的測定。

保存溫度

2-8°C 避光

注意事項

1.探針-20°C密封避光保存;

2.避免反復(fù)凍融。

有效期

6個月

檢測方法

熒光酶標(biāo)儀

適用樣本

細胞,分離的線粒體等

產(chǎn)品特點

1.廣 泛適用于各種體外模型;不再局限于單層細胞,還能測定懸浮細胞、微生物和特定的3D培養(yǎng)物;

2.簡單的“混合-檢測” 方案允許使用多種其他分析試劑盒進行多參數(shù)分析;

3.可逆轉(zhuǎn)，能夠觀察耗氧量的瞬態(tài)和長時間變化;

4.可適配多數(shù)熒光酶標(biāo)儀以及標(biāo)準(zhǔn)96孔和384孔;

5.以高通量的形式方便地測量;

6.無需等待專用設(shè)備空閑所需的實驗室時間，也無需大額資金專用設(shè)備投入。

產(chǎn)品應(yīng)用

線粒體功能和細胞代謝研究

儀器準(zhǔn)備

1.熒光酶標(biāo)儀

須配備相應(yīng)的波長過濾器和溫度控制器。

2.離心機

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒.

試劑準(zhǔn)備

PBS緩沖液或者HBSS

耗材準(zhǔn)備

1.黑色透明底熒光專用96孔培養(yǎng)板

2.離心管

3.吸頭

4.-次性手套

使用注意事項

1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。

2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

3.并非所有細胞類型都消耗足夠用于檢測的氧氣。

4.必須使用熒光培養(yǎng)專用的透明底黑色培養(yǎng)板,減少檢測時各孔之間的光互相干擾。

使用方法

1. 準(zhǔn)備細胞模型。

2. 培養(yǎng)好的待檢測細胞移除培養(yǎng)基,用PBS洗滌細胞。

3.加入100 μuL新鮮培養(yǎng)基。

4.加入4 μuL BBoxiProbe⑧R01氧熒光探針，充分混勻。

5. (可選) 可以在此處添加待測試化合物(通常為1-10uL) (如果需要的話)

6.每孔加入100 μ氧氣封閉液。

7.然后用該細胞板進行熒光細胞外O2消耗變化情況檢測。

激發(fā)波長455 nm - 468 nm,發(fā)射波長603 nm。測定熒光強度,每2分鐘或3分鐘讀取-次。

8.繪制耗氧率曲線。

9. 計算每個樣品的斜率值。